Животный индикан. Определение индикана в моче

Индикан (калиевая соль 3-гидроксииндолилсирчанои кислоты) — один из конечных продуктов азотистого обмена, который выделяется с мочой.

Образование

Он образуется в почках из 3-гидроксииндолилсирчанои кислоты, которая является продуктом обезвреживания индола. Последний поступает в кровь из толстого кишечника, где образуется из триптофана в результате гниения белков. Индол является токсичным веществом. В клетках печени индол сначала окисляется до 3-гидроксииндолу — индоксилу, а дальше сочетается с серной кислотой, образуя индоксилсирчану кислоту. Калиевая или натриевая соль этой кислоты называется индикан.

Физиология человека

У здорового человека содержание индикана в крови находится в пределах 1,0-4,7 мкмоль / л. Количество индикана в моче за сутки 5-20 мг. Повышение содержания индикана в крови выше 0,140-0,160 мг% называется индиканемии, а повышение содержания в моче — индиканурии. При избытке индикана моча приобретает коричневый цвет. По количеству этого вещества в моче человека делают вывод об интенсивности процессов гниения белков в толстом кишечнике, а также о функциональном состоянии печени.

Повышение уровня индикана в крови и моче наблюдается при усилении гниения в кишечнике, длительных запорах, туберкулезе кишечника, диспепсии, тифах, при гнойных очагах в организме (абсцессах, гнойных бронхитах), а также при болезнях печени, хроническом поражении почек, язвенной болезни желудка, иногда при беременности.

В печени происходит обезвреживание токсических веществ, поступающих из толстого кишечника, с помощью двух систем:

o система микросомального окисления, o система конъюгации.

Цель и суть работы систем обезвреживания заключается в маскировке токсичных групп (например, в феноле токсична ОН-группа) и/или в придании гидрофильности молекуле, что способствует ее выведению с мочой и отсутствию накопления в нервной и жировой ткани.

М ИКРОСОМАЛЬНОЕ ОКИСЛЕНИЕ

Микросомальное окисление – это последовательность реакций с участием оксигеназ и НАДФН , приводящих к внедрению атома кислорода в состав неполярной молекулы и появлению у нее гидрофильности.

Реакции осуществляются несколькими ферментами, расположенными на мембранах эндоплазматического ретикулума (в случае in vitro они называются микросомальные мембраны). Ферменты организуют короткую цепь, которая заканчивается цитохромом P450 . Цитохром Р450 включает один атом кислорода в молекулу субстрата, а другой – в молекулу воды.

Субстрат окисления необязательно является чужеродным веществом (ксенобиотиком). Микросомальному окислению также подвергаются предшественники желчных кислот и стероидных гормонов и другие метаболиты.

К ОНЪЮГАЦИЯ

Для маскировки токсичных групп и придания большей гидрофильности молекуле существует процесс конъюгации, т.е. ее связывания с очень полярным соединением – таким соединением являются глутатион, серная, глюкуроновая, уксусная кислоты, глицин, глутамин. В клетках они часто находятся в связанном состоянии, например:

o серная кислота связана с 3"-фосфоаденозин-5"-фосфатом и образует фосфоаденозинфосфосульфат (ФАФС),

o глюкуроновая кислота связана с уридилдифосфорной кислотой и образует уридилдифосфоглюкуроновую кислоту (УДФГК),

o уксусная кислота находится в виде ацетил-S-KoA.

О БРАЗОВАНИЕ ЖИВОТНОГО ИНДИКАНА

Примером реакций обезвреживания веществ является превращение индола в животный индикан. Сначала индол окисляется с участием цитохрома Р450 до индоксила, затем конъюгирует с серной кислотой с образованием индоксилсульфата и далее калиевой соли – животного индикана.

При повышенном поступлении индола из толстого кишечника образование индикана в печени усиливается, далее он поступает в почки и выводится с мочой. По концентрации животного индикана в моче можно судить об интенсивности процессов гниения белка в кишечнике.

View All Members

Provided that you have the appropriate permissions, you will be able to see the Members entry on the or in the . Clicking one of these links will bring you to the View all Members page, the default page for the Members List section. There is also a page in this section, where you can search for members registered on the forum.

On the View All Members page, you will see the list of all the members registered on the forum. Pages are used so that there are not too many members listed on one single page. When there is more than one page, the additional pages can be selected from here. On the right side of the "Members List" title bar, every letter of the English alphabet is displayed. These letters are used to jump to the usernames of registered members that begin with that letter, so that you do not have to scroll through several pages to find them. This does not filter out all of the usernames beginning with different letters, but rather serves as an anchor, so you will be directed to usernames that start with the selected letter.

All usernames in the memberlist can be ordered by: Status (Online/Offline), Username, Email, Website, ICQ, AIM, YIM, MSN, Position, Date Registered, and Posts. These column headings are links that can be used to sort the list in ascending or descending order, or to reverse the sort order of the column under the heading that is currently used to sort the list.

Search for Members

This section allows you to do either a simple search for members, or to choose to filter your results by using additional parameters. You can search for members based on their username, email address, messenger nickname, website, or position.

The search results will show matches for the terms that you enter in the search field. If any of the additional search parameters are selected, then the results will also be filtered accordingly. The search does not look only for full-word exact matches, but also for any parts of text that match the search terms. For this reason, if the search term represents only part of the word that you are looking for, then the results may show many more matches than expected.

Some of the additional search parameters relate to information that users can either choose not to include in their profile (messenger nickname, website) or they can choose not to reveal it to the public (email), so using these parameters might not always bring up the results that you are looking for. The results of the search will be more accurate the more letters/words that are used in the search.

Индикан представляет собой калиевую или натриевую соль индоксил серной кислоты, образующейся в печени при обезвреживании индола. Индол, в свою очередь, образуется в кишечнике из триптофана при гниении белков.

В моче здорового человека индикан содержится в незначительных количествах и обычными лабораторными тестами не определяется.

Проба Обермейера

Принцип метода . В результате гидролиза эфирной связи сильной кислотой индикан превращается в индоксил, который, окисляясь хлоридом железа (III), превращается в синее индиго.

Реактивы . 1) ацетат свинца , 100 г/л раствора; 2) концентрированная соляная кислота с относительной плотностью 1,19; 3) хлорид железа (FeCl 3 × 6Н 2 O); 4) реактив Обермейера: 0,4 г FeCl 3 × 6Н 2 O растворяют в 100 мл концентрированной соляной кислоты; 5) хлороформ; 6) тиосульфат натрия (Na 2 S 2 O 3 × 5Н 2 O), 200 г/л раствора.

Ход определения . В пробирку вносят 4 мл мочи, прибавляют 0,4 мл раствора ацетата свинца для осаждения желчных пигментов, солей и других веществ, мешающих реакции. Фильтруют. 1–2 мл фильтрата смешивают с равным объемом реактива Обермейера и через 5 мин добавляют 0,5–1 мл хлороформа, пробирку закрывают пробкой и осторожно перемешивают содержимое, неоднократно переворачивая пробирку. Если слой хлороформа окрашивается в синий или красный цвет, его отсасывают и добавляют к нему 2–3 капли раствора тиосульфата натрия.

Оценка результатов . После добавления раствора тиосульфата натрия окраска не исчезает - проба положительна.

Проба Яффе

Принцип метода . В результате гидролиза эфирной связи сильной неорганической кислотой индикан превращается в индоксил, который, окисляясь перманганатом калия, превращается в синее индиго.

Реактивы : 1) 2% раствор перманганата калия (КMnO 4): 2 г перманганата растворяют в 98 мл дистиллированной воды; 2) концентрированная соляная кислота; 3) хлороформ (СНСl 3); 4) тиосульфат натрия (Na 2 S 2 O 3 × 5Н 2 O) кристаллический.

Ход определения . В химическую пробирку наливают 5–6 мл освобожденной от белка профильтрованной мочи, прибавляют равный объем концентрированной соляной кислоты и 2–3 мл хлороформа. К содержимому пробирки по каплям (!) добавляют 2% раствор перманганата калия (избыток перманганата приводит к окислению индиго в изатин желтого цвета). Пробирку закрывают пробкой и осторожно смешивают содержимое путем многократного (15–20 раз) ее переворачивания. При энергичном встряхивании может образоваться стойкая эмульсия, препятствующая разделению жидкости на слои. Пробирку устанавливают в штатив и через несколько минут учитывают реакцию по окраске слоя хлороформа, находящегося на дне.

Оценка результатов . При наличии индикана в моче хлороформ окрашивается в фиолетовый или синий цвет. При недостаточном добавлении перманганата калия (слабое окисление), приеме больными препаратов йода слой хлороформа окрашивается в розово-красные оттенки. Дифференцируют окраску, обусловленную приемом лекарственных средств, с помощью тиосульфатной пробы: при добавлении к пробе кристаллов тиосульфата натрия розовато-красный оттенок исчезает, окраска, зависящая от индиго, остается.

В некоторых случаях и у здоровых лиц хлороформ может окраситься в бледно-голубой цвет, что также принимают за норму.

Клиническое значение . Индикан в моче обнаруживается при непроходимости кишечника, спастических колитах, перитоните, когда создаются условия для усиления гнилостных процессов в кишечнике, а также при усиленном распаде белков в организме.